搖瓶機菌種培養說明四大步

*步：搖瓶機復蘇：根據所培養的細菌選擇適宜的培養基，大部分細菌在 LB 培養基中在超凈工作臺先用 1 毫升左右的適宜的培養 基溶解冷凍菌， 然后轉移到 10 毫升中試管 （放入 4 毫升液體培養基） 中，一般在 37 攝氏度搖床靜止或低轉速培養 12 小時或者過一晚（溫度 取決于所培養的細菌適宜生長的溫度）。

第二步：搖瓶機平板劃線培養：在平板（瓊脂+液體培養基）劃 線，放 37 攝氏度培養箱培養箱中倒置培養 6 小時~12 小時，在平板 上觀察是否形成了單菌落.

第三步：搖瓶機挑單菌落：在超凈臺中挑選典型單菌落，置入 10 毫升中試管（內有 5 毫升液體培養基）中，在 37 攝氏度搖床，轉 速 200 轉培養 12 小時或者過一晚，肉眼能看到試管渾濁。

第四步：搖瓶機按照 1：20 的比例將中試管中的菌液移到 250 毫 升三角瓶（放入 100 毫升液體培養基），，培養條件同前。注意：所有的接種操作均需要在層流罩中，培養基應無菌。

以上四步，搖瓶機是一般細菌培養都會涉及到的步驟，有些操作人員在實際搖瓶機試驗過程中有時會省略復蘇這一環節， 直接拿燒熱 的接種環挑些菌液冰水，在平板上劃線培養，等長出菌落后，選取合 適的菌落搖瓶機培養。另外，要提醒大家的是：（1）搖瓶機是搖轉 方式進行混合攪拌，而發酵罐是直接機械攪拌;（2）搖瓶機發酵罐可 以取樣或者儀表時時檢測， 但是搖瓶機因為量小不能方便的進行控制 和檢測，這些在后邊的文章會詳細介紹到，大家先做初步了解即可。

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